Изоэлектрическое фокусирование
Зарегистрируйся в два клика и получи неограниченный доступ к материалам,а также
промокод
на новый заказ в Автор24. Это бесплатно.
Введение
Актуальность темы заключается в том, что метод изоэлектрического фокусирования в настоящее время всё более широко внедряется в медицинскую биохимическую лабораторную практику и фармацевтический анализ инновационных лекарственных средств на основе рекомбинантной РНК, мононуклеальных тел, ингибиторов протеаз. С развитием человеческих познаний о природной структуре высокомолекулярных соединений появились новые возможности медицинской диагностики и лечения заболеваний новыми биотехнологическими лекарственными средствами. Метод изоэлектрического фокусирования позволяет разделять белковые смеси для их детального исследования. С развитием биохимиии, генной инженерии, медицинской и фармацевтической наук были разработаны методы и специальное оборудование для исследования белковых структур. На основе этих исследований синтезируются биотехнологическими методами новые лекарственные препараты. Для контроля их качества и используется изоэлектрическое фокусирование в фармацевтическом анализе. В настящее время этот метод включён во все национальные и межгосударственные фармакопеи. Поэтому специалистам в области фармацевтического и медицинского анализа актуально иметь представление о современном методе разделения высокомолекулярных (белковых) структур изоэлектрическом фокусировании, т.к. этот метод позволяет устанавливать информацию о гомогенности исследуемого белка. Цель работы – исследовать фармакопейный метод изоэлектрического фокусирования. Для достижения поставленной цели для решения выдвинуты следующие задачи: Изучить информационные материалы по исследуемой теме. Охарактеризовать метод изоэлектрического фокусирования. Описать этапы проведения фармацевтического анализа методом изоэлектрического фокусирования и используемые для этого средства: оборудование, реактивы, условия. Провести сравнительный анализ статей различных национальных фармакопей, регламентирующих использование метода изоэлектрического фокусирования в анализе лекарственных средств. Объект исследования – метод изоэлектрического фокусирования. Предмет исследования – применение метода изоэлектрического фокусирования в фармацевтическом анализе, медицинской диагностике и других отраслях. Структура работы состоит из введения, основной части, заключения, списка использованных источников и приложений. При проведении исследования использовано 12 источников.
Метод изоэлектрического фокусирования в фармацевтическом анализе
Изоэлектрическое фокусирование – метод разделения амфотерных веществ с большой молекулярной массой, например, белковой природы на структурные единицы (пептиды) при создании необходимой рН среды [10]. Как трактует англо-русский словарь генетических ...
Открыть главуЗаключение
При изучении теоретических основ метода Изоэлектрического фокусирования были сделаны выводы: Метод Изоэлектрического фокусирования – физико-химический метод, используемый в фармацевтическом анализе для идентификации, определения чистоты и количественного содержания генно-инженерных и высокоочищенных лекарственных препаратов. Метод основан на миграции макромолекул в градиенте рН под действием постоянного электрического поля в область значений рН, соответствующих изоэлекрическим точкам каждой из макромолекул. Метод является современным способом разделения высокомолекулярных соединений, в основном белков. Он широко используется также для очистки белков от примесей. Для проведения определения используют прибор, состоящий из высоковольтного источника питания с программой, электрофорезной камеры из жесткой пластмассы, содержащей охлаждающую пластину из соответствующего материала для поддержания геля; платиновых электродов, которые соединяются с гелем посредством электродных (бумажных или гелевых) полосок необходимой ширины, длины и толщины, пропитанных анодным и катодным буфером, а также формы для геля. Методику выполнения определения регламентирует ОФС.1.7.2.0021.15. Метод изоэлектрического фокусирования используется в фармации, медицине, биологии, а также других хозяйственных сферах деятельности и науке.
Список литературы
Государственная Фармакопея РФ XIV издания. – М.: МЗ РФ, 2015. – т. 1. – 1814 с. Арефьев В.А. Англо-русский толковый словарь генетических терминов. / В.А. Арефьев, Л.А. Лисовенко. – М.: Изд-во ВНИРО, 1995. – 407 с. Кисин М.В., Ирнесян Л.С., Лозинский Т.Ф. О внедрении методов установления полиморфных белков и ферментов в экспертную практику. // Экспертная практика ВНИИ МВД СССР.- М.; 1987.-С. 21-23 Кузнецов В.В. Молекулярно-генетические и биохимические методы в современной биологии растений / под ред. В.В. Кузнецова, В.В. Кузнецова, Г.А. Романова. – М.: БИНОМ:Лаборатория знаний, 2012. – 487 с. Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков, пер. с англ., под ред. Ю. А. Овчинникова, с. 297, М., 1974, библиогр.; Пиголкин Ю.И. Новая рабочая классификация следов крови / под ред. проф. Ю.И. Пиголкина, Е.Н. Леонова, И.А. Дубровин [и др.] // Судебно-медицинская экспертиза. – 2014. - № 57 (1). – с.11-15 Полунина Т.А. Применение 2D-электрофореза для получения «белковых портретов» лизатов бактериальных культур возбудителей особо опасных инфекций / Т.А. Полунина, Ю.С. Варшавская, С.П. Заданова, Я.М. Краснов // Проблемы особо опасных инфекций. – 2016. - № 1. – с. 97-101 Троицкий Г.В., Ажицкий А.Ю. Теоретические основы и применение для изоэлектрического фокусирования белков // Биоорганическая химия. – 1982. – т.2 - № 6. – с. 863. Туркова Я. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам. – ч. II.: Пер. с англ. / Я. Туркова, Б. Мелоуи, О. Мотл [и др.] / под ред. О. Микеша. – М.: Мир, 1982. – 381 с. Большая Медицинская энциклопедия. – в 30 т. - 3-е изд. / под ред. Б.В. Петровского. – М.: Издательство: Советская энциклопедия, 1988. – 16700 с. Ригетти П. Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение. – [Электронный ресурс]. – Режим обращения: https://www.studmed.ru H i g h e t t i P. G. a. Drysdale J. W. Isoelectric focusing, в кн.: Lab. techn. in biochem. a. mol. biol., ed. by T. S. Work a. E. Work, v. 5, pt 2, Amsterdam— N. Y., 1976.
