Автоматические ветеринарные гемоанализаторы. Принципы работы, обзор рынка

Введение
В настоящее время в ветеринарии существует необходимость проведения ряда медицинских исследований в течении короткого периода времени. В лечении домашних животных специалист должен собрать максимально возможную информацию о функциональном состоянии организма. Такой подход требует специального оборудования для автоматизированного проведения анализа крови – гемоанализаторов.
На сегодняшний день исследование крови может осуществляться как мануальным способом. Так и при помощи гемоанализаторов. Каждый из способов имеет свои достоинства и недостатки.
В частности мануальный способ более дешев, может применяться в любой лаборатории, однако требует достаточных навыков лаборанта и занимает больше времени, чем автоматические и полуавтоматические методы. С другой стороны, низкая стоимость мануально метода является одной из причин его применения и в настоящее время.
Анализаторы состава и морфологии крови, а также биохимических параметров крови, мочи и других биологических жидкостей в настоящее время все больше внедрятся в ветеринарную практику. Особенно важно использование автоматических гемоанализаторов в случае острых состояний и инфекционных симптомов.
Плюс современных приборов состоит в их автоматической работе, моментальность результата и стабильность изменений пр незначительном показателе погрешности.
Цель работы является изучение принципа работы и ассортимента представленных на рынке ветеринарного оборудования гематологических анализаторов.
1. Виды ветеринарных функциональных ветеринарных анализаторов
Лабораторная диагностика заболеваний животных имеет большое сходство с аналогичной диагностикой человека и основана на тех же принципах, в частности неотъемлимым компонентом исследований является исследование проб кровина наличие в них характерных патологических изменений.
Для постановки диагноза используются как мануальные методы, так и специфические функциональные анализаторы, применение которых находит все большее распространение в ветеринарной практике.
В настоящее время в ветеринарной диагностики нашли свое применение следующие автоматические и полуавтоматические анализаторы.
Собственно гематологические анализаторы позволяют изучать структуру крови и морфологический ее состав.
Существует две разновидности гематологических анализаторов, первые из которых предназначены для проведения биохимического анализа, а вторы необходимы для морфологического анализа крови. С использованием гематологических анализаторов врач может провести исследование структуры элементов, состава плазмы, содержания веществ-производных аминокислотного, углеводного, азотистого, минерального, жирового обмена [2].
По классу работы гематологические анализаторы подразделятся на три типа:
полуавтоматические фотометрические или кондуктометрические, имеют ограниченный круг показателей (6–9) без возможности осуществления глубокой дифференциации;
автоматические фотометрические, данные анализаторы запрограммированы на изучение 10–20 параметров и способны выделять субпопуляции лейкоцитов;
автоматические гемоанализаторы с лазерным светорассеиванием, способны выделять пять субпопуляций лейкоцитов и определять более 25 различных гематологических параметров
Следовательно, при использовании автоматических гематологических анализаторов ветеринарный врач может осуществлять полный клинический анализ крови с расчетом лейкоцитарной формулы за короткий период. При этом возрастает производительность ветеринарной лаборатории и проводимое число анализов на максимальное количество параметров с минимальными погрешностями.
Гематологический анализатор крови способен выявить все нужные в клинической практике параметры крови. Каждый элемент обозначается специальным буквенным кодом [5].
Параметры гематологических анализаторов:
WBC – количество лейкоцитов, выявление которых проводится после процедуры лизации эритроцитов.
RBC - количество эритроцитов в 1 мкл. Проба крови перед подсчетом разводится гематологическим анализатором и, помимо эритроцитов, состоит из лейкоцитов и тромбоцитов.
HGB – количество гемоглобина в единице объема

.
MCV – средний объем эритроцитов.
HCT – показатель гематокрита т.е. объема крови, который приходится на эритроциты.
MCH – означает среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.
PLT – показывает количество тромбоцитов. Подсчет проводится в одной камере с эритроцитами.
MPV – показатель среднего объема тромбоцитов в 100 мл крови по отношению к объему эритроцитов.
PCT – показатель, характеризующий тромбоцитарную массу, выражен в процентном соотношении к общему объему крови.
LY% – показатель, характеризующий количество лимфоцитов в процентах.
MO% – показатель, характеризующий количество моноцитов в процентах.
NE% – показатель, характеризующий количество нейтрофилов в процентах.
EO% – показатель, характеризующий количество иозонофилов в процентах.
BA% – показатель, характеризующий количество базофилов в процентах.
RE% – показатель, характеризующий количество ретикулоцитов в процентах.
HLR% – показатель, характеризующий количество зрелых ретикулоцитов в процентах.
Имея на руках данные значение, специалист может сделать вывод о нарушениях в составе анализируемой пробы крови и поставить предположительный диагноз или подтвердить/опровергнуть диагноз, поставленный при первоначальном осмотре животного.
2. Принцип работы гематологических анализаторов
В основе действия современных гематологических анализаторов лежат таки принципы как кондуктометрия, лазерное светорассеяние, которое позволяет проводить дифференциацию ретикулоцитов, а также фотометрии, позволяющей определить содержание в исследуемых пробах крови гемоглобина.
В основе устройства автоматических гематологических анализаторов находятся три основные технологии:
Метод электрического импеданса
Метод проточной цитометрии
Метод флуоресцентной проточной цитометрии
Данные технологии предполагают применение химических реагентов, которые приводят к лизису или изменении клеток, позволяющих произвести фиксации измеряемых параметров крови.
В частности, явление электрического импеданса дает возможность проводить дифференциацию эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов по объему. При добавлении ядрообразующего агента, сжимающего лимфоциты больше, чем другие лейкоциты, что в итоге позволяет дифференцировать объем лимфоцитов [7].
Метод электрического импеданса или кондуктометрии (метод Коултера) получил широкое распространение и используется в большинстве гематологических анализаторов.
Сущность кондуктометрии состоит в том, что пробу крови пропускают между узкое отверстие между двумя электродами. Причем размер отверстия составляет одну клетку. Импеданс (проводимость среды) изменяется по мере того как между электродами проходят клетки. Это изменение пропорционально количеству клеток, прошедших между электродами. Данная зависимость и позволяет производить дифференцированный подсчет клеток крови в исследуемом образце [3].
Метод электрического импеданса дает возможность проводить клинический анализ крови, определяя гранулоциты, лимфоциты, и моноциты. Однако при помощи его невозможно различить гранулярные лейкоциты одинакового размера, такие как эозинофилы, базофилы и нейтрофилы.
Скорость автоматического подсчета по данному методу в гематологических анализаторах составляет до 10000 клеток в секунду, поэтому скорость проведения анализа крови этим методом составляет менее минуты.
Метод поточной цитометрии является более сложным и дорогостоящим методом исследования по сравнению с методом импеданса. Он требует более дорогостоящих реагентов. Но с другой стороны дает возможность получения более детализированной морфологической картины крови. Данный метод является наилучшим для лейкоцитарной пятикомпонентной формулы.
Суть метода лазерной поточной цитометрии состоит в том, что поток образца крови проходит через лазерный луч. В ходе анализа измеряют поглощение луча, а рассеянный свет измеряется под разными углами для того, чтобы определить зернистость, диаметр и внутреннюю сложность клетки.
Указанные характеристики представляют собой те морфологические характеристики клетки, которые можно определяются и при мануальном способе анализа морфологии крови.
Расширить применение метода поточной цитометрии можно при помощи специальных флуоресцентных добавок, что приводит к возможности оценивать специфические популяции клеток в ходе проведения анализа (см