Анализ и обоснование методик качественного и количественного определения препарата.

Введение

Фармакопейный анализ лекарственных средств включает в себя оценку качества по множеству показателей. В частности, устанавливается подлинность лекарственного средства, анализируется его чистота и проводится количественное определение. Первоначально для проведения такого анализа применяли исключительно химические методы: реакции подлинности, реакции на содержание примесей и титрование при количественном определении (метод, также основанный на химическом взаимодействии).
Со временем повысился не только уровень технического развития фармацевтической отрасли. Параллельно изменились и требования к качеству лекарственных средств. Особенно остро этот вопрос стал после учащения случаев поступления недоброкачественных препаратов в аптеки.
Целью данной работы является: анализ и обоснование методик качественного и количественного определения препарата раствор морфина гидрохлорида 1 % для инъекций, а так же обоснование проведения испытаний на чистоту использованных в фармакопейной статье.
Для осуществления цели данной работы были поставлены следующие задачи:
1) Провести анализ литературы по данной теме, рассмотреть соответствующую фармакопейную статью;
2) Описать и обосновать методики качественного (испытания на подлинность) и количественного определения;
3) Описать и обосновать испытания на чистоту исследуемого препарата.


Испытание на подлинность
Строение морфина гидрохлорида:

В молекуле морфина гидрохлорида содержится остаток морфинана, третичная аминогруппа, простая эфирная группа, гидроксогруппа, фенольный гидроксил, связанная хлористоводородная кислота и связанная вода.
УФ-спектроскопия, основана на поглощении анализируемым веществом УФ-излучения определенной длинны волны. УФ-спектр 0,02%-ного водного раствора морфина гидрохлорида имеет один максимум светопоглощения при 285 нм ± 1 нм и плечо от 250 до 350 нм. Полученный спектр сравнивают с рисунком спектра, приведенном а ФС. Поглощение УФ-излучения обусловлено наличием в структуре морфина фрагмента – замещенного ароматического радикала.

Реакция окислительной конденсации с реактивом Марки, которая протекает в о-положении по отношению к фенольному гидроксилу.


За счет наличия в молекуле морфина гидрохлорида третичной аминогруппы, которая в свою очередь связывает хлористоводородную кислоту, а так же за счет гидрофильности (наличие в молекуле связанной воды) дает возможность селективно удерживаться на сорбенте, это и дает возможность применять метод ВЭЖХ. На хроматограмме, полученной в разделе "Количественное определение" методом ВЭЖХ, время удерживания основного пика должно совпадать со временем удерживания ГСО морфина (± 1,5 %).
Приготовленне раствора ГСО морфина. Около 0,020 г (точная навеска) ГСО морфина (ФС 42-2382-93) количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 5 мл 0,1М раствора кислоты хлористоводородной, доводят до метки подвижной фазой.
2 мл препарата дает характерную реакцию на хлориды.

белый, творожистый
осадок
Реакция осуществляется за счет наличия в молекуле морфина связанной хлористоводородной кислоты.

Для проведения характерной реакции на хлориды поступают следующим образом: к 2 мл раствора прибавляют 0,5 мл разведенной азотной кислоты и 0,5 мл раствора нитрата серебра; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в разведенной азотной кислоте и растворимый в растворе аммиака

.
AgCl + 2NH3 → [Ag(NH3)2]Cl
Для солей органических оснований испытание растворимости образовавшегося осадка хлорида серебра проводят после отфильтровывания и промывания осадка водой.


Испытание на чистоту
Посторонние примеси
Посторонней примесью в растворе морфина гидрохлорида 1 % для инъекций является кодеин. Наличие данной примеси обусловлено образованием кодеина в процессе синтеза морфина как побочного продукта. Данная примесь допускается. Синтез морфина осуществляется различными способами. Например, опий обрабатывают теплой водой. Водный раствор упаривают в вакууме до удельного веса 1,17 и смешивают с равным объемом спирта. Из этого спиртового экстракта при добавлении аммиака осаждают смесь морфина с наркотином, которую отделяют от маточного раствора. Смесь этих двух алкалоидов растворяют в разведенной соляной кислоте, добавляют ацетат натрия и осаждают наркотин, который затем отфильтровывают. В растворе остается морфин, который осаждают аммиаком, отфильтровывают и сушат. Полученный технический морфин очищают от примесей и переводят в гидрохлорид, который несколько раз перекристаллизовывают из воды.
Кодеин определяют с помощью метода ТСХ (тонкослойной хроматографии).
Как и в случае с морфином за счет наличия в молекуле кодеина третичной аминогруппы, а так же за счет гидрофильности (наличие в молекуле связанной воды) дает возможность селективно удерживаться на сорбенте, это и дает возможность применять метод ТСХ.

Испытуемый раствор. 5 мл препарата помещают в стакан вместимостью 100 мл и выпаривают на водяной бане досуха.
Растворы сравнения. Приготовление раствора РСО морфина. Около 0,02 г (точная навеска) морфина гидрохлорида (ФС 42-302 1 -94) растворяют в 10 мл спирта 95 %. Срок годности раствора 3 месяца в защищенном от света месте.
Приготовление раствора ГСО кодеина. Около 0,01 г (точная навеска) кодеина (ФС 42-2771-91) растворяют в 10 мл спирта 95 %. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл спирта 95%.
Срок годности раствора 3 месяца в защищенном от света месте.
После охлаждения сухой остаток растворяют в 2 мл воды и прибавляют 8 мл спирта 95 %. 0,02 мл (100 мкг) полученного раствора наносят на линию старта пластины Сорбфил (ТУ-26-1 1-17-89) или Силикагель 60 F256 размером 5х10 см. Рядом наносят 0,02 мл (40 мкг) раствора рабочего го образца (РСО) морфина (1) и 0,01 мл (1 мкг) раствора Государственного стандартного образца (ГСО) кодеина (П). Пластину сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру, насыщенную смесью растворителей: метиленхлорид-спирт метиловый-аммиака раствор (175:25:4) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт растворителя пройдет до конца пластины, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин, обрабатывают реактивом Драгендорфа модифицированным.
Реакция морфина с реактивом Драгендорфа:

На хроматограмме испытуемого препарата должно появиться пятно на уровне пятна РСО морфина. Допускается наличие пятна на уровне пятна ГСО кодеина, по величине и интенсивности не превышающее пятно ГСО кодеина.


Количественное определение
Метод
Ацидиметрия в неводной среде.
Количественное определение морфина гидрохлорида выполняют методом неводного титрования